Minisatélites

Considerações Gerais - Marcadores minisatélites constituem, na essência, uma variação da técnica RFLP: na etapa de hibridização seleciona-se clones de múltipla cópia que possibilitam a amostragem de vários locos do genoma em um único ensaio. Minisatélites são sequências de DNA cuja unidade repetitiva é observada lado a lado inúmeras vezes em um loco, e que se repetem também em vários outros locos no genoma. Isto significa que ao isolar o núcleo de uma sequência repetitiva minisatélite, ele pode ser utilizada como sonda para gerar em uma única reação uma impressão digital do DNA de um organismo. Por amostrar inúmeros locos ao mesmo tempo, este perfil eletroforético observado é muitas vezes suficiente para identificar e diferenciar um indivíduo do outro, com base nas variações observadas no DNA. Esta técnica tem, por exemplo, grandes aplicações na análise forênsica em seres humanos e, da mesma forma, no estudo de diversidade genética da fauna e flora. É possível se identificar alelos de um loco minisatélite em uma autoradiografia em estudos de população segregante, mas o grande número de locos amostrados dificulta tremendamente este esforço. Trata- se, portanto, de marcadores tipicamente co-dominantes, mas em geral analisados como marcadores dominantes em estudos de diversidade genética em populações naturais.

Conteúdo Informativo - Minisatélites se apresentam, de maneira geral, como uma técnica de alto conteúdo informativo (Figura 1). A capacidade multiplex da técnica é um dos seus maiores atributos. Dezenas de locos são amostrados em uma única reação, uma boa parte deles apresentando polimorfismo entre indivíduos de uma população. O número médio de alelos por loco é baixo pela incapacidade imediata de identificação dos mesmos devido à complexidade dos padrões de bandas analisados. Quanto à acessibilidade da técnica, as considerações são semelhantes às levantadas para RFLP de cópia única, isto é, baixa acessibilidade devido ao trabalho envolvido. Há um descréscimo, contudo, no custo e na rapidez dos ensaios por dado obtido, visto que um maior número de locos é amostrado em cada ensaio.

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