DNA & Cromossomos
Replicação de DNA em Xenopus
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- Interessante: Disruption of nuclear lamin organization blocks the elongation phase of DNA replication.
Moir RD, Spann TP, Herrmann H, Goldman RD
O papel da proteina LAMINS nuclear na replicação do DNA não é clara. Para estudar este assunto, núcleos foram adicionados a extratos de ovos de Xenopus contendo AraC, um inibidor reversível que bloqueia perto do início da fase de elongação da replicação do DNA. Mutantes dominantes LAMIN - negativos faltando o domínio NH(2) - terminal foram adicionados aos núcleos para atrapalhar a organização da proteina LAMIN.
- Interessante: Induction of DNA synthesis or apoptosis in mammalian nuclei by Xenopus egg extracts that fail to support the replication of sperm chromatin. Logothetou-Rella H, Sun WH, Brooks RF
Extrato de ovos de Xenopus são largamente utilizados para estudar a replicação de DNA de organismos superiores. Entretanto, a cromatina de Xenopus como amostra, é comum a eficiência de replicação variar de extrato para extrato, por razões ainda não esclarecidas. Aqui os pesquisadores mostram que a maioria dos extratos são incapazes de realizar a replicação de esperma, porém são capazes de induzir a síntese de DNA em núcleos de mamíferos intactos. Aqueles que não o fazem, induzem a apoptose. J Mol Biol 2000 Feb 25;296(3):769-86
- Interessante: Mechanisms ensuring rapid and complete DNA replication despite random initiation in Xenopus early embryos. Lucas I, Chevrier-Miller M, Sogo JM, Hyrien O
A replicação cromossomal inicia sem especificidade de sequencia em intervalos médios de aproximadamente 10 kb durante o 'rápido ciclo celular do embrião prematuro de Xenopus. Se a distribuição de origens é randômica, algums intervalos entre inter-origens seriam muito longas pra se replicarem inteiramente antes do término da fase S. Para investigar o que garante uma complementação da replicação do DNA, nos examinamos os intermediários de replicação de plasmídeos de vários tamanhos (5.3-42.2kbp) em extrato de Xenopus por eletroforese em gel de duas dimensões e microscópio eletrônico. Nos confirmamos que a replicação inicia sem especificidade de seqüência em todos plasmídeos. E demostramos pela primeira vez que eventos de iniciação múltiplos ocorrem em grandes plasmídeos, mas não nos pequenos (<10kb), em intervalos médios de aproximadamente 10 kb. A interferência da origem deve prevenir os eventos de iniciação múltipla nos pequenos plasmídeos. Eventos de iniciação múltiplos não são sincronizados ou regulados espacialmente. A densidade da "bolha" de replicação é mais intensa nos intermediários tardios do que nos recentes, mostrando que a freqüência de iniciação aumenta durante a fase S, aumentado a velocidade de replicação nos estágios tardios. Sugerimos que as origens potenciais são abundantes e distribuídas randomicamente, mas o aumento da freqüência de iniciação durante a fase S, e possivelmente a interferência da origem, regula a ativação da origem para garantir a rápida finalização da replicação.
- Interessante: Nucleoplasmin-mediated chromatin remodelling is required for Xenopus sperm nuclei to become licensed for DNA replication.
Gillespie PJ, Blow JJ
- Interessante: DNA replication in quiescent cell nuclei: regulation by the nuclear envelope and chromatin
structure. Lu ZH, Xu H, Leno GH.
- Interessante: Analysis of mammalian origin specification in ORC-depleted Xenopus egg extracts. Yu G, Wu JR, Gilbert DM.
- Interessante: Identification of the sequence responsible for the nuclear localization of human Cdc6.Takei Y, Yamamoto K, Tsujimoto G.
- Interessante: The critical role of the MAP kinase pathway in meiosis II in Xenopus oocytes is mediated by
p90(Rsk).Gross SD, Schwab MS, Taieb FE, Lewellyn AL, Qian YW, Maller JL.
- Interessante: DNA replication and nuclear organization: prospects for a soluble in vitro system.
- Interessante: WWW Virtual Library for Xenopus
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Daniel Cardoso de Carvalho
ICB-UFMG