PROTOCOLO DE PRECIPITAÇÃO DE DNA POR NACL/ETANOL
1.
colocar NaCl até atingir a
concentração final de 100 mM;
2.
adicionar 3 volumes de
etanol absoluto gelado (pode-se usar 2,5 vol.etOH);
3.
misturar e deixar a -20ºC
overnight ou -70ºC 1 hora;
4.
centrifugar 20 min a 4ºC;
5.
descartar sobrenadante;
6.
secar a vácuo e
ressuspender em 10 µl ddH2O;
7.
verificar clivagem do pUC
12 em eletroforese agarose 0.8%.
Exemplo: adicionar
a cada tubo de 100 µl, 5 µl de NaCl 5M e 200 µl de
etanol absoluto gelado (2,5X volume)