PROTOCOLO DE PRECIPITAÇÃO DE DNA POR NACL/ETANOL

 

1.      colocar NaCl até atingir a concentração final de 100 mM;

2.      adicionar 3 volumes de etanol absoluto gelado (pode-se usar 2,5 vol.etOH);

3.      misturar e deixar a -20ºC overnight ou -70ºC 1 hora;

4.      centrifugar 20 min a 4ºC;

5.      descartar sobrenadante;

6.      secar a vácuo e ressuspender em 10 µl ddH2O;

7.      verificar clivagem do pUC 12 em eletroforese agarose 0.8%.

 

Exemplo:        adicionar a cada tubo de 100 µl, 5 µl de NaCl 5M e 200 µl de
                             etanol absoluto gelado (2,5X volume)