DNA & Cromossomos
LOCUS CONTROL REGION
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- Interessante: A expressão do locus da beta-globina em mamíferos é regulada durante o desenvolvimento por um cluster de sítios hipersensíveis a DNaseI (HSs) conhecido como Locus Control Region. Deleções em regiões específicas deste cluster mostram que a formação dos sítios
hipersensíveis é independente dentro do LCR, concluindo que não é necessário um sítio inicial de formação que precediria a formação dos outros sítios hipersensíveis.
- Interessante:Na tentativa de obter novos enhancers para expressão em mamíferos, foram criados Locus Control Region sintéticos que usaram como gen repórter a beta-lactoglobulina. Estas construções, que possuiam várias cópias de sítios de transcrição localizados dentro de
promotores proximais foram transfectadas em células de mamíferos e em camondongos transgênicos. Para surpresa, estas construções reduziram a expressão, mostrando que nem todas combinações de sítios de ligação de fatores de transcrição vão estimular a transcrição.
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 Estudos do LCR do locus da beta globina humana revelaram que a atividade deste locus \'e9 dependente de elementos distintos em a\'e7\'e3o-cis. Estudos mostram que a acetila\'e7\'e3o de H3 e H4 e a reloca\'e7\'e3o do locus para longe da heterocromatrina centrom\'e9rica n\'e3o requerem o LCR. Em promotores dependentes de LCR, a acetila\'e7\'e3o da H3 est\'e1 envolvida com a ativa\'e7\'e3o dos genes. Assim, o mecanismo do LCR \'e9 importante para uma alta express\'e3o do locus da beta globina humana.\par }{\f2\fs16\cf1\lang1046
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 LCR s\'e3o genes regulat\'f3rios que capacitam a express\'e3o g\'eanica independente da posi\'e7\'e3o cromossomal em ratos transg\'eanicos. Estudos recentes mostram a abilidade destas regi\'f5es na repress\'e3o de heterocromatinas e tem identificados fatores de a\'e7\'e3o cis e trans que participam da ativa\'e7\'e3o e silenciamento g\'eanico.\par }{\f2\fs16\cf1\lang1046
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 Foram analisados os n\'edveis de express\'e3o dos genes da beta globina em camundongos adultos com dele\'e7\'f5es em regi\'f5es do LCR (HS2, HS3, HS5 e 6). \par PCR do RNA extra\'eddo e HPLC das cadeias globinas mostraram uma redu\'e7\'e3o na express\'e3o do cluster das globinas.\par }{\f2\fs16\cf1\lang1046
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 Foi feito um estudo sobre a intera\'e7\'e3o de prote\'ednas com o HS2. Bleomicina e hedamicina que s\'e3o capazes de marcar prote\'ednas ligadas ao DNA foram usadas neste estudo. Foi observado que nucleossomos posicionados pr\'f3ximos ao HS2 previnem o deslizamento de nucleossomos para este s\'edtio hipersens\'edvel, mantendo esta regi\'e3o aberta e formando uma \'e1rea de prote\'e7\'e3o.\par }{\f2\fs16\cf1\lang1046
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 O LCR tem uma atividade de enhancer importante para ser inclu\'edda em vetores ter\'e1picos de beta-globina. Estudos realizados revelaram a depend\'eancia da atividade de HS3 relacionada com o intron 2 da beta-globina e a regi\'e3o de 260 pb 3'do enhancer da beta-globina. A constru\'e7\'e3o de um vetor com estes elementos e o HS3 podem expressar genes de interesse da beta-globina e ser usado como um cassete na terapia g\'eanica.\par }{\f2\fs16\cf1\lang1046
- Interessante:\par }{\b\f2\cf2\lang1046 Estudos feitos com RT-PCR foram usados para quantificar os efeitos das modifica\'e7\'f5es nas sequencias da beta-globina (epsilon, gamma, delta-globina) em camundongos transg\'eanicos. Os resultados encontrados sugerem influencias competitivas n\'e3o diretamente ligadas \'e0 n\'edveis de transcri\'e7\'e3o e dist\'e2ncia do LCR. A rela\'e7\'e3o das medi\'e7\'f5es feitas na express\'e3o para possibilitar um modelo bin\'e1rio de a\'e7\'e3o do LCR est\'e3o sendo discutidas.\par }\pard \ri-1584\nowidctlpar\widctlpar\adjustright {\f2\lang1046 \par }\pard \ri-1584\nowidctlpar\widctlpar\adjustright {\fs16\cf1\lang1046
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